Jak działają spektrofotometry?

Czym jest spektrofotometria?

Jest to powszechnie używana metoda oznaczania obecności i stężenia ściśle określonych substancji w próbce. Opiera się ona na ilościowym pomiarze światła odbitego lub jego transformacji przez badaną próbkę. W badaniach metodą spektrofotometrii do celów analitycznych wykorzystywane są przejścia energetyczne zachodzące w cząsteczkach badanych próbek. Wspomniane przejścia są wchłaniane przez promieniowanie elektromagnetyczne. Proces ten może zachodzić w świetle widzialny, nadfiolecie oraz podczerwieni. Spektrofotometria znajduje zastosowanie w pracach laboratoryjnych, szczególnie wykonywanych przez biologów czy chemików, ale też medycynie estetycznej czy stomatologii.

Badanie metodą UV-Vis

Spektroskopia jest metodą pozwalającą na analizę widm powstających na skutek oddziaływania promieniowania elektromagnetycznego na określoną materię. Ze względu na różnorodność promieniowania, jakie może być zastosowane do wykonania analizy, wyróżniamy spektroskopię UV, VIS, IR i NMR. Metoda UV-Vis pozwala na oznaczenie substancji organicznych takich jak ketony, aldehydy, kwasy, aminy oraz węglowodory aromatyczne. Ponadto takie badanie pozwala też na oznaczenie substancji nieorganicznych jak ozon czy dwutlenek węgla. Dzieje się tak, ponieważ spektroskopia UV-Vis wykorzystuje promieniowanie w zakresie 200-750 nm, które wywołuje zmiany poziomów energetycznych i ich przejścia elektronowe na poziomy o wyższej energii. Dzięki temu substancje organiczne czy niektóre związki nieorganiczne stają się wyraźniejsze i możliwe do wyodrębnienia.

Zasada działania spektrofotometru

Zasada działania spektrofotometru oparta jest na analizie widma światła. Powstaje ono na skutek oddziaływania różnego rodzaju promieniowania na określoną substancję. Wiązka światła przechodzi przez pryzmat lub siatkę dyfrakcyjną. Tutaj wybierana jest odpowiednia długość fal, która następnie przepuszczana jest przez szczelinę. Stąd światło przechodzi przez próbkę w kuwecie i pada na detektor. Takie zjawisko pozwala na wykonanie zapisu spektrometrycznego badanej substancji.